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酶標(biāo)儀測量波長的設(shè)定以什么為標(biāo)準(zhǔn)
酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動兩大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。 測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
實驗中波長的選擇主要依賴于你要測的樣品。樣品在不同的波長下,對光的吸收值也不同,但都有一個吸收峰,一般選擇吸收峰時的波長進行實驗。比如同樣是MTT法做細(xì)胞毒性實驗,就有使用490nm和570nm兩種波長選擇,如果使用了DMSO作為試劑,在溶解后呈紫(紅)色,在490nm有最大吸收值;而對于SDS和酸化異丙醇,則選用570nm(655nm作為參考波長)。
酶標(biāo)儀波長設(shè)定還要看你用的是什么酶標(biāo)儀,如果是光柵式單色器(可以1nm步進調(diào)節(jié)),就可以直接設(shè)定吸收峰的波長;如果是濾光片式單色器,因為受濾光片波長限制,有時你就需要選接近使用波長的濾光片,比如655nm,你就可能選用650nm的濾光片。